In celkweekexperimenten worden pipetten zeer vaak gebruikt en de nauwkeurigheid van hun werking heeft direct invloed op de betrouwbaarheid en herhaalbaarheid van experimentele resultaten. Hierna volgen enkele tips voor pipetbewerking in de celkweek, waarvan ik hoop dat het nuttig zal zijn voor uw experiment.
1. Kies de juiste pipet en tip
- Pipet -selectie: kies de rechterpipet volgens het te overdreven volume vloeistof. Het normale werkvolumebereik van de meeste pipetten is 10-100% van het aangegeven bereik. Probeer te voorkomen dat het volume van een pipet op minder dan 10% van het maximale volume wordt ingesteld en gebruik een pipet met kleine afstand voor pipetting-bewerkingen met kleine volumes.
- Tipselectie: kies een tip die overeenkomt met de pipet en zorg ervoor dat de punt strak is ingebracht om luchtlekkage te voorkomen. Bovendien moeten voor specifieke experimenten (zoals aseptische werking) geautoclaveerde tips worden geselecteerd.
2. Spoel de punt af
Spoel de tip 2-3} Times om een homogene film in de tip te vormen, waardoor de nauwkeurigheid van pipetting wordt verbeterd. Bovendien kan het het capillaire effect in micropipettes neutraliseren, waardoor de temperatuur in de punt consistent kan zijn met de monstertemperatuur voor pipetten met een groot volume. Opgemerkt moet worden dat spoelen een negatief effect kan hebben op de resultaten bij het pipetteren van warme en koude oplossingen.
3. Controleer de snelheid van aspiratie en dosering
- Soepel drukken: druk op de regelknop soepel en continu los, in plaats van te drukken en plotseling vrij te geven. Dit kan de vorming van bubbels voorkomen en de nauwkeurigheid van pipetten verbeteren.
- Pauze: laat na het aspireren van de vloeistof de punt ongeveer 1 seconde in de vloeistof, vooral voor die viskeuze vloeistoffen. Het onmiddellijk uittrekken van de punt kan leiden tot onvolledige vloeibare aspiratie.
4. Let op de onderdompelingsdiepte van de punt
- Micropipette: de tip moet worden ondergedompeld 2-3 mm.
- Pipet met grote afstand: de onderdompelingdiepte moet 5-6 mm zijn. Als de punt te diep wordt ondergedompeld, wordt de lucht in de punt gecomprimeerd, waardoor te veel vloeistof wordt opgezogen. Vloeistof die op het oppervlak van de punt blijft, kan ook de resultaten beïnvloeden.
5. Verticale werking
Dompel de pipet zo verticaal mogelijk in het monster, bij voorkeur zonder af te wijken van de verticale positie met meer dan 20 graden. Naast het verbeteren van de nauwkeurigheid van het pipetvolume, kan dit ook voorkomen dat de vloeistof in de pipet stroomt als gevolg van overmatig kantelen.
6. Observeer de pipetpunt
Let bij het voorbereiden van de vloeistof op of er overtollige druppeltjes zijn bevestigd aan het oppervlak van de pipetpunt. Na het ontladen van de vloeistof kan de punt van de pipetpunt aan de zijkant van de container worden aangeraakt om ervoor te zorgen dat de ontlading grondig genoeg is om te voorkomen dat de laatste druppel vloeistof op de punt van de pipetpunt blijft.
7. Kies de juiste pipettemethode
- Positieve zuigmethode: geschikt voor de meeste vloeistoffen. Wanneer u vloeistof zuigt, drukt u op de knop naar het eerste stoppunt en laat u de knop langzaam vrij om terug te keren naar het startpunt. Druk vervolgens op de knop naar het eerste stoppunt om de vloeistof te ontladen, pauzeer een tijdje en blijf op de knop op het tweede stoppunt drukken om de resterende vloeistof uit te blazen. Laat eindelijk de knop los.
- Achterwaartse zuigmethode: geschikt voor zeer viskeuze vloeistoffen, biologisch actieve vloeistoffen, gemakkelijk schuimende vloeistoffen of extreem kleine hoeveelheden vloeistoffen. Zuig eerst meer vloeistof in dan het vaste bereik en blaas de resterende vloeistof niet uit bij het overbrengen van de vloeistof.
8. Houd de pipet schoon en onderhouden
- Regelmatige kalibratie: na het gebruik van de pipet voor een bepaalde periode moet deze worden gekalibreerd om de nauwkeurigheid ervan te waarborgen.
- Reiniging: na elk gebruik moet de pipet op tijd worden gereinigd om te voorkomen dat resterende vloeistof het volgende experiment verontreinigt.
9. Aseptische werking
In de celkweek is aseptische operatie erg belangrijk. Let bij het gebruik van een pipet op de volgende punten:
- Desinfectie: vóór gebruik, veeg de pipet en de punt af met een alcohol wattenbolletje voor desinfectie.
- Vermijd kruisbesmetting: gebruik een nieuwe tip voor elk monster om kruisbesmetting te voorkomen.
Met de bovenstaande tips kunt u pipetten voor celkweekexperimenten nauwkeuriger en efficiënter gebruiken en de betrouwbaarheid en herhaalbaarheid van experimentele resultaten verbeteren. Ik hoop dat deze tips je zullen helpen!